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南宫28弹力与胶原纤维染色实验

来源:苗心林 日期:2025-07-19

实验方法原理
弹力纤维由随机交联盘绕的一些肽链组成,包含丰富的二硫键糖蛋白成分,故称为弹性蛋白。这种纤维质地易于与染色液中的碱基结合。为了更好地显示弹力纤维和胶原纤维的成分,本研究采用了维多利亚蓝、丽春红和ku味酸的组合双重染色方法。

南宫28弹力与胶原纤维染色实验

实验材料
本实验使用的材料包括石蜡组织切片、维多利亚蓝、糊精、间苯2酚、蒸馏水、乙醇、三氯化铁水溶液、浓盐酸、苯/酚及二甲/苯中性树胶。仪器方面,我们使用了60℃恒温箱、滤纸等。

实验步骤
维多利亚蓝染色液的配制如下:将2g维多利亚蓝、0.5g糊精和4g间苯2酚溶解于200ml蒸馏水中,并加热煮沸,边煮边搅拌,持续约5分钟。在另一容器中,加热25ml的30%三氯化铁水溶液,然后慢慢倒入混合液中,继续煮沸3分钟,搅拌使其呈胶冻状。关闭火源后冷却并过滤,将残渣连同滤纸一起放入60℃恒温箱中烘干,得到深蓝色细颗粒状的粉末,再将其溶解在400ml的70%乙醇中,随后加入4ml浓盐酸和5g苯/酚,待成熟后使用。

具体操作步骤为:
1. 石蜡组织切片常规脱蜡至水。
2. 切片在70%乙醇中洗涤2分钟。
3. 将切片浸入维多利亚蓝液中染色2至5小时。
4. 直接放入95%乙醇中进行分色,持续数秒。
5. 用蒸馏水冲洗2分钟。
6. 使用丽春红-ku味酸染色液滴染切片3分钟。
7. 用无水乙醇冲洗多余染色液两次。
8. 采用二甲/苯进行透明化并使用中性树胶进行封固。

注意事项
1. 维多利亚蓝染色液可以在室温下存放较长时间,染色液浸染后可再倒回原处,便于重复使用。
2. 95%乙醇分色后,应立即浸入水中,利用显微镜观察染色程度,若染色浅或深,可再进行染色或分色。
通过该实验,我们观察到弹力纤维呈蓝绿色,胶原纤维呈红色,背景则呈现出黄色。这些成果进一步表明了南宫28品牌在生物医疗领域的染色技术优势,助力研究者更好地理解弹力纤维的生物学特性。

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