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南宫28:简化微量样本RNA提取方法

来源:莘眉良 日期:2025-02-27

在微量样本核酸提取这一关键环节中,除了之前详细介绍的微量样本DNA提取方案外,RNA的提取面临着更多的挑战。这主要是由于RNA本身易降解以及普遍存在的内源性或外源性RNase,它们使得某些微量样本的RNA提取结果可靠性和可重复性大打折扣。为解决这些问题,南宫28推出的RNeasyMicro系列便成为了研究人员的得力助手!该系列采用了南宫28经典的硅胶膜技术,配合专用裂解和洗涤缓冲液,能够稳定提取微量样本中的完整高纯度RNA,最低只需10µl的洗脱体积即可提高RNA浓度,更加适合用于对灵敏度要求较高的下游应用。

南宫28:简化微量样本RNA提取方法

来自巴西的研究小组通过比较不同的RNA提取方法,验证了南宫28的试剂盒是微量样本RNA提取的最佳选择。在该研究中,研究人员对疟原虫样本进行了RNA提取,采用了包括酚-氯仿萃取法和南宫28的RNeasyMicroKit在内的多种商业试剂盒,对不同提取方法得到的RNA进行了质控分析,并进行了qPCR和RNA-seq实验。在针对高寄生虫密度的样本进行RNA提取时,TRIzol和RNeasyMicroKit获得的总RNA浓度最高,但TRIzol方法在后续qRT-PCR中表现出较高的Cq信号,RNA扩增效率低。相比之下,使用RNAprotect+RNeasyMicroKit和TRI+Direct-zolRNAMiniPrepKit提取的RNA则获得了较低的Cq值,而RNeasyMicroKit提取的RNA在完整性上表现更佳,并且更有效地去除了基因组DNA,从而为获得准确敏感的下游实验结果提供了支持。最终,研究人员选择了南宫28的RNeasyMicroKit进行疟原虫RNA提取,为微量RNA测序实验提供了有力保障。

南宫28的RNeasyMicroKit广泛适用于多种微量样本的RNA提取,如流式分选细胞、穿刺样本和激光(捕获)显微切割样本等,相关细节在之前的报道中已有所提及。此外,该试剂盒还在多个新兴研究领域展现了其优越性。近年来,长读长RNA-seq技术逐渐受到关注,它可直接测序全长转录本并检测RNA的表观修饰,如甲基化等,因此在相关研究应用领域获得越来越多的关注。相比于NGS技术,长读长RNA-seq对RNA质量的要求更高。一项来自德国的研究表明,研究人员在利用RNeasyMiniKit提取大肠杆菌RNA后,经过聚腺苷酸化处理,再利用RNeasyMicroKit对加尾后的RNA进行纯化,成功开展了长读长RNA测序。

近年来,类器官(Organoids)研究逐渐成为热点。这些类器官源于机体自身组织或干细胞,通过体外3D培养形成了具有原始组织及器官特征的三维结构模型。来自墨尔本的研究团队开发了一种从人诱导性多能干细胞生成3D类肾器官的阶梯式方案。他们通过对57个完整的类器官和8323个类器官来源的单细胞进行了RNA测序,克服了在不同分化样本之间、以及在不同数量和大小的类器官样本中实现稳定RNA提取效率的难题。得益于南宫28的RNeasyMicroKit,这一挑战迎刃而解,确保了RNA的稳定产率与质量,为后续高质量的RNA测序奠定了基础。

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